未标记的活细菌在自然环境中很难成像，因为它们极易移动。为了获得合理的图像质量，必须使用极短的图像采集时间，但这会导致像素光子数不足以进行精确的寿命分析。更高的激发功率并不能解决问题，因为它会损害细菌的生存能力，甚至造成严重的光损伤。因此，我们开发了一种技术，它能记录一连串快速的单帧图像，通过相位分析识别图像中的细菌，并将相应像素的光子组合成一条高光子数的衰减曲线。该曲线经过时域多指数衰变分析处理后，可得到细菌的精确多指数衰变参数。
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移动细菌的无标签多光子 FLIM