我们展示了结合蔡司 LSM 880 NLO 多光子激光扫描显微镜的 bh FASTAC（快速采集）FLIM 系统的性能。FASTAC系统使用单个快速混合探测器，其光子脉冲被分配到四个并行的TCSPC FLIM通道中，参见bh news 2018/04。由于每个新光子都会进入下一个 TCSPC 模块，因此该原理大大减少了计数损失和堆积效应。图像可在蔡司 LSM 880 的最短帧时间内采集记录。重要的是，该系统在时间分辨率、时间通道宽度、时间通道数量或像素数量方面没有任何妥协。使用快速探测器时，IRF 宽度小于 25 ps FWHM，每个像素记录的图像通常有 1024 个时间通道。需要注意的是，只有当样品能够为系统提供足够高的光子速率时，才能实现快速采集。对于含有大量高亮度荧光团的样品来说就是如此。在分子成像实验、代谢 FLIM、FRET 实验或荧光团与细胞内高度特异性目标相连的其他应用中，情况并非总是如此。FASTAC 系统的优势在于，即使在这种样本有限的条件下，其结果也至少与标准 bh FLIM 系统一样好。
应用说明：使用蔡司 LSM 880 NLO 的快速采集多光子 FLIM
左图：BPAE 样品的 FLIM，1024x1024 像素，每个像素 1024 个时间通道。采集时间为 10 秒。右图Convallaria 样品，512 x 512 像素，1024 个时间通道。采集时间 0.6 秒。