DCS-120 MACRO FLIM 系统

宏观物体的 FLIM
代谢成像
扫描区域直径达 15 毫米
紫外线增强光学器件
两个完全并行的 TCSPC FLIM 通道
通过bh 的多维 TCSPC 流程进行记录
提供快速 FLIM
紧凑型 bhSimple-Tau或Power-TauTCSPC 系统
通过快速振镜扫描
通过二向色或偏振分光镜进行通道分离
可单独选择的针孔和滤光片
一个或两个BDL-SMN或BDS-SMps 二极管激光器
通过带 AOTF 的超连续激光器进行可调激发
两个完全平行的共焦检测通道
两个HPM-100-40 GaAsP混合探测器
可选：两个HPM-100-06混合探测器，IRF 宽度 <20 ps FWHM
可选：用于近红外 FLIM 的HPM-100-50混合探测器
可选：两个 HPM-100-06 混合探测器，IRF 宽度 <20 ps FWHM多波长 FLIM
卓越的时间分辨率：电 IRF 宽度 3.5 ps FWHM
时间通道宽度低至 405 fs
百万像素 FLIM，高达 2048 x 2048 像素，256 个时间通道
同时 FLIM/PLIM
宽带版本，与可调激光器兼容
电子针孔对准
可选：通过电动样品台进行空间镶嵌 FLIM

Description

DCS-120 MACRO 型 DCS 系统可直接扫描扫描仪焦平面内的物体。可对 15 毫米大小的物体进行成像，分辨率约为 25 微米。与DCS-120 共焦 FLIM系统一样，DCS-120MACRO 使用ps 二极管激光器激发、振镜快速扫描、共焦检测和bh 的多维 TCSPC 技术进行 FLIM，以高时间分辨率、高空间分辨率和高灵敏度记录荧光寿命图像。DCS-120 MACRO 系统具有快速光束扫描和高灵敏度的特点，可用于活体成像。DCS-120 的功能包括在两个完全平行的波长通道中同时记录 FLIM 或稳态荧光图像、激光波长复用、时间序列 FLIM、时间序列记录、Z 叠加 FLIM、磷光寿命成像（PLIM）、荧光寿命瞬态扫描（FLITS）和 FCS 记录。其应用重点是荧光团与其分子环境的相互作用引起的寿命变化。典型的应用包括离子浓度测量、FRET 实验、代谢成像、快速生理效应成像和植物生理学。

Specifications

请参阅：

DCS-120 共焦和多光子 FLIM 系统用户手册

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Documents

The bh TCSPC Handbook
10th edition, September 2023

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手册

bh FLIM 系统的应用领域是分子成像。典型的应用包括离子浓度、pH 值或局部粘度成像，通过 FRET 进行蛋白质相互作用实验，以及通过 NADH 和 FAD 的荧光衰减结合氧气测量进行代谢成像。在这些应用中，bh FLIM 系统具有高灵敏度、高时间分辨率、高定时稳定性，并能将多指数衰减曲线分解为各个组成部分。其他优势还包括能够记录毫秒级的快速生理效应 FLIM，以及同时记录多个激发和发射波长。

Applications

Principles

DCS-120 MACRO 系统的原理

DCS-120 MACRO 系统直接在 DCS-120 共焦扫描头的主像平面上扫描宏观样品。原理如下图所示。

两束不同波长的激光通过单模光纤注入扫描仪。组合激光束由两个快速移动的振镜扫描。扫描透镜将激光束聚焦到扫描仪前方的一个图像平面上。在扫描物体时，该平面与样品表面重合。当振镜改变光束角度时，激光焦点就会在样品上扫描。样品中激发的荧光被扫描透镜准直后，由振镜去扫描，并通过主二向分光镜与激发光分离。荧光光束进一步被分成两个光谱或偏振分量，并聚焦到针孔中。通过针孔的光被送入HPM-100-40 或 HPM-100-06 混合探测器。在最大扫描振幅（最小变焦）下，系统扫描的图像区域约为 15 x 15 毫米。DCS MACRO 的空间分辨率约为 20 微米，可以获得清晰度极高的图像。为了充分利用扫描仪的分辨率，FLIM 数据的记录像素可达 20248 x 2048。时间通道的数量可从 64 到 4096 之间选择，建议选择 1024。下图是一个示例。

FLIM 数据采集
FLIM 数据采集采用 bh 的多维 TCSPC 流程。它基于单个荧光光子的检测、激光脉冲周期内光子时间的确定、光子检测时激光束在扫描区域内的位置，以及扫描坐标和激光脉冲周期内时间的三维光子分布。另请参阅DCS-120 共焦 FLIM 系统原理。
详情请参阅《DCS-120 共焦和多光子 FLIM 系统手册》和《bh TCSPC 手册》。