用于 Zeiss LSM 710 / 780 / 880 / 980 的 FLIM 系统

Description

从入门级到高级分子成像应用的 FLIM 系统

全新的 Becker & Hickl FLIM 集成到蔡司 Zen 软件中，使您受益匪浅，同时享受无与伦比的用户友好性和最高性能！

对于蔡司 LSM980，我们隆重推出全新的 B&H SPCConnect 软件。它通过 TCP（传输控制协议）将 bhSPCM软件和蔡司 ZEN 软件结合在一起。这意味着 SPCM 与 ZEN 同时运行，两个软件组件可自由交换命令、系统参数和数据。SPCM 可完全在后台运行，即 Zen 用户甚至无需注意到 B&H SPCM 软件正在运行。

这种独特的集成使用户不仅能进行基本的 FLIM 实验，还能执行复杂的测量程序，如自动 Z 堆栈记录、快速时间序列记录、快速触发累积等。

FLIM 图像（第一矩法）直接显示在 Zen 中，并可在 Zen 之外进一步处理。精确的数据分析工具，包括拟合程序等，也可直接从 Zen 中启动：由 GPU 驱动的SPCImage NG软件。它可执行单衰变、双衰变和三衰变分析，并直接提供寿命、成分振幅以及代谢比率、FLIRR、FRET 效率和 FRET 距离等生物相关参数。SPCImage 可在 GPU 上运行，即使图像大小在百万像素范围内，也能在数秒内提供 FLIM 结果。凭借这些功能，新型 FLIM 系统非常适合于从入门级 FLIM 到高端多维分子成像的各种应用。

Becker & Hickl 公司自 2000 年以来一直为蔡司 LSM 系列激光扫描显微镜生产 FLIM 系统。从 LSM 510 开始，为 LSM 710、LSM 780、LSM 880 和 LSM 980 提供 FLIM 系统。所有系统都基于 bh 的多维 TCSPC 技术，具有接近理想的光子效率、超高的时间分辨率、出色的空间分辨率和深度分辨能力、多指数衰减能力和较短的采集时间。

B&H 最近升级了用于蔡司 LSM 980 的 FLIM 系统，配备了新的 TCSPC / FLIM 模块和新软件。标准系统有两个并行超快速记录通道，还可根据需要增加其他通道。使用新型SPC-180NX TCSPC FLIM模块和超快HPM-100 混合探测器，可获得小于 20 ps FWHM（8 ps RMS）的 IRF 宽度。因此，该系统能够分辨出寿命小于 10 ps 的衰变成分。FLIM 系统既可用于多光子显微镜，也可用于共聚焦显微镜。多光子显微镜使用非扫描检测，可从生物组织深层获得清晰图像。共焦系统将探测器连接到扫描仪的光学输出端，使用 LSM 980 的全系列滤光片和针孔选择功能。两种版本的探测器都是兼容的，可以在显微镜的输出端口之间互换。或者，也可以将探测器同时连接到共焦端口和 NDD 端口，并通过软件命令激活。

新型 bh / 蔡司 FLIM 系统可与 bh 的新型集成 SPCConnect 软件一起使用。它在 TCP（传输控制协议）级别上将bh SPCM 软件和蔡司 ZEN 软件结合在一起。实际上，这意味着 SPCM 在 ZEN 框架内运行，两个软件组件可自由交换命令、系统参数和数据。与 DLL 层面的集成相比，TCP 集成的优势在于，除了基本的 FLIM 功能外，还可使用 Z 堆栈记录、时间序列记录、快速触发累积、FLITS 和同步 FLIM / PLIM 等功能。此外，用户还可以立即对两边的功能进行升级。

数据分析由bh 的传奇 SPCImage 数据分析软件执行。它可以进行单衰变、双衰变和三衰变分析，并直接提供寿命、成分振幅和生物相关参数，如代谢率、FLIRR、FRET 效率和 FRET 距离。SPCImage 可在 GPU 上运行，即使是百万像素的图像，也能在数秒内得出 FLIM 结果。凭借这些功能，新型 FLIM 系统非常适合于从入门级 FLIM 到高端多维分子成像的各种应用。

详情请参见 350 页的用户手册 "用于蔡司 LSM 710/780/880 激光扫描显微镜的模块化 FLIM 系统"和"用于 LSM 980 显微镜的手册增编"。

Specifications

寿命测量：时域
激发高频脉冲激光器
原理：利用 bh 的多维 TCSPC 技术进行 TCSPC FLIM
建立寿命图像：光子在到达时间和扫描坐标上的分布
扫描速率：可在任何扫描速率下工作
建立荧光相关数据：绝对光子时间的相关性
一般操作模式双光谱或偏振通道 FLIM、多波长 FLIM
时间序列 FLIM、显微镜控制时间序列、Z-堆栈 FLIM、镶嵌 FLIM、x、y、z、时间、
与 FLIM 同时进行的激发波长多路复用 FLIM、FLITS（荧光寿命-瞬时扫描）、PLIM（磷光寿命成像）、FCS、交叉 FCS、门控 FCS、PCH、
单点荧光衰减记录、单点磷光衰减记录

TCSPC 系统：bh Simple Tau 或 Power Tau TCSPC 系统
并行 TCSPC / FLIM 通道数：典型值2，最多 4
TCSPC / FLIM 模块： SPC-150NX 或 SPC-150NXSPC-150NX 或 SPC-180NX
电气时间分辨率1.5 ps RMS / 3.5 ps FWHM
最小时间通道宽度：405 fs
超过 100 秒的定时稳定性： 优于 0.8 ps RMS
30 分钟以上定时稳定性：优于 5 ps RMS
饱和计数率：每个通道 10 MHz
探测器输入恒定分辨器
来自激光器的参考（同步）输入：恒定分辨器
与扫描同步：通过帧时钟、行时钟和像素时钟脉冲
扫描速率：适用于任何扫描速率
与激光复用同步：通过 TCSPC 模块的路由功能
记录多波长数据：通过路由功能同时记录 16 个通道的数据
实验触发功能：TTL，用于 Z 堆栈 FLIM 和显微镜控制的时间序列
TCSPC 系统的操作模式：单 f(t)、示波器、f(txy)、f(t,T)、f(t) 连续流
FIFO（相关/FCS/MCS）模式、扫描同步输入成像、扫描同步输入与连续流
FIFO 成像、与 MCS 成像相结合的 FIFO 成像、镶嵌成像、时间序列成像
多探测器操作、激光多路复用操作、循环和重复功能、自动保存功能
显示功能（在线）：强度图像、门控强度图像、寿命图像、ROI 衰减曲线、衰减曲线、FCS 曲线、强度轨迹。
同时显示的图像数量：8
最大图像格式，像素 X x 像素 Y x 时间通道：4096 x 4096 x 64、2048 x 2048 x 256、1024 x 1024 x 1024、512 x 512 x 4096、256 x 256 x 4096

软件
数据采集软件：bh SPCM，嵌入在 Zeiss ZEN Sosftware 中
操作系统：Windows 10 64 位Windows 10 64 位
数据分析软件：bh SPCImage NG
数据分析原理：使用 GPU 处理的 MLE
模型函数单、双、三指数衰减，带不完全衰减的单、双、三指数衰减，移位分量模型。
IRF 建模：衰变数据的合成 IRF 函数拟合

用于共焦 FLIM 的激发源：1 至 4 ps 二极管激光器
可用波长：375 毫米至 785 纳米
重复率20、50、80 MHz 和连续波
脉冲宽度：40 ps 至 100 ps
用于多光子 FLIM 的激发光源：Zeiss LSM NLO 系统的 Ti:Sa 激光器

探测器：HPM-100-40 混合探测器，带 GaAsP 阴极，波长 300 至 710 纳米
可选：HPM-100-06 探测器，<20 ps FWHM IRF 宽度，300 至 600 纳米
可选：HPM-100-50 探测器，波长 400 至 900 纳米
可选：MW-FLIM GaAsPMW-FLIM GaAsP 多波长探测器

如需了解更多规格，请参阅用于蔡司 LSM 710 / 780 / 880 系列显微镜的 FLIM 系统用户手册。

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Documents

bh FLIM 系统的应用领域是分子成像。典型的应用包括离子浓度、pH 值或局部粘度成像，通过 FRET 进行蛋白质相互作用实验，以及通过 NADH 和 FAD 的荧光衰减结合氧气测量进行代谢成像。在这些应用中，bh FLIM 系统具有高灵敏度、高时间分辨率、高定时稳定性，并能将多指数衰减曲线分解为各个组成部分。其他优势还包括能够记录毫秒级的快速生理效应 FLIM，以及同时记录多个激发和发射波长。

Gallery

用于 Zeisss LSM 的 bh FLIM 系统的基本功能

• 从入门级 FLIM 到高端多维分子成像功能
• 多光子 FLIM
• 共焦 FLIM
• 1 到 4 个波长通道的并行记录
• 两个激发波长的复用记录
• 16 个波长通道的多波长 FLIM
• 多光子多光谱 NDD FLIM
• 通过可选的 FASTAC FLIM 系统实现快速采集 FLIM
• 可用 bh Express FLIM 技术实现快速 FLIM
• 近红外 FLIM
• 时间序列 FLIM：快速时间序列或显微镜控制时间序列
• Z 叠加 FLIM
• 空间镶嵌 FLIM
• 生理效应的时间镶嵌 FLIM，每幅图像可低至 40 毫秒
• FLITS：在线性扫描中记录瞬时寿命效应，分辨率低至 1 毫秒
• 与 FLIM 同时进行的 PLIM（磷光寿命成像
• 快速预览模式
• 在仪器配置和操作模式之间轻松切换
• 以 LSM 的任何扫描速率运行
• 高分辨率图像，高达 2048 x 2048 像素
• FCS 和 Cross-FCS，由于使用混合探测器，因此无后脉冲