FLIM 系统

始于 1998 年的 FLIM 系统 – 快速可靠 – 超高分辨率 – 入门级到高端产品

进入技术说明:

为什么使用 bh FLIM

关于 bh 的 FLIM 技术

Bh 的 FLIM 技术结合使用了单光子检测和共焦或多光子激光扫描技术。这样,它就结合了在空间和时间上解析光学数据的最精确技术。与时间相关的单光子检测以理想的灵敏度和前所未有的时间分辨率提供荧光衰减数据,而扫描则提供无横向和纵向散射、无焦外模糊的三维图像。综合这些特点,bh FLIM 在图像质量和时间分辨率方面优于任何基于相机的 FLIM 技术。

FLIM 通常被认为只是一种对比技术,用于提高显微镜下不同荧光团的分辨能力。然而,这还远远不是全部。通过提供高精度的空间分辨荧光衰减数据,bh 的 TCSPC FLIM 技术几乎成为一种理想的分子成像技术。在 FLIM 图像的像素中记录的荧光衰减函数包含了荧光团分子环境的信息。TCSPC FLIM 具有单光子灵敏度、活细胞兼容性和光学切片功能,因此是活体科学应用的理想成像技术。它能提供有关蛋白质相互作用、与药物相互作用、细胞和组织代谢状态、生理相关离子浓度、pH 值和氧浓度、氧化还原状态以及其他生物相关参数的信息。

从一开始,bh FLIM 系统(以及 bh FLIM 数据分析!)的设计就考虑到了这些应用。因此,bh FLIM 系统(和 bh FLIM 数据分析!)具有多波长 FLIM、Z-stack FLIM、时间序列 FLIM、快速生理效应记录、无标记成像、激发-波长复用、代谢 FLIM 和同步 FLIM / PLIM 等技术能力,以及多指数衰减分析、MLE、FRET 分析、代谢成像和 GPU 处理等数据分析功能,可为生命科学应用提供支持。使用 bh FLIM 系统的充分理由。

从入门级到高性能分子成像的 FLIM 系统

基于其专有的多维 TCSPC 技术,Becker & Hickl 率先将 FLIM 系统引入生命科学市场。用于眼科检查的 FLIM 系统于 1996 年推出,用于显微镜检查的 FLIM 系统于 1998 年推出。从那时起,bh FLIM 系统不断改进,增加了新的 TCSPC 设备、光学系统、扫描仪、光源和探测器。bh FLIM:不仅仅是荧光-终身成像,请参阅 8 页摘要。现在,Becker & Hickl 可提供完整的单光子和多光子显微镜 FLIM 系统,包括激光器、显微镜、扫描装置、检测光学器件、探测器、TCSPC 电子装置以及数据采集和数据分析软件、用于宏观样品的 FLIM 系统,以及用于各种外部制造商生产的激光扫描显微镜的单光子和多光子 FLIM 系统。为了方便这些系统的应用,Becker & Hickl 免费提供了大量的产品和应用资料。例如

bh TCSPC 手册,1032 页,目前为第 10 版,1032 页

DCS-120 共焦和多光子 FLIM 系统,用户手册,452 页

用于蔡司 LSM 系列激光扫描显微镜的 FLIM 系统,356 页

用于激光扫描显微镜的 FLIM 系统,概述手册,40 页

DCS-120 共焦和多光子 FLIM 系统,概述手册,48 页

更大更好的光子 – 实现 FLIM 最佳效果的必经之路。教育手册。45 页

有关 Becker & HicklFLIM 系统和荧光寿命成像显微镜的更多信息,请查阅“文献“。

如需更多支持和产品咨询,请使用我们的联系表格或致电+49 (30) 212 80 02-0

超高分辨率 FLIM

bh FLIM 系统的寿命分辨率可达亚 10 ps。这比其他制造商的 FLIM 系统高出 5 到 10 倍。超高时间分辨率不仅有助于分子成像、FRET 成像和一般的代谢成像,还为以前未知的 FLIM 应用开辟了广阔的天地。例如,请参见

恶性黑色素瘤中的超快荧光衰减

天然类胡萝卜素的超快荧光衰减

高分辨率多光子 FLIM 揭示人类头发中的超快荧光衰减

蘑菇孢子的双光子荧光成像揭示了超快衰减成分

荧光寿命成像显微镜的应用

Becker & Hickl FLIM 系统的应用范围广泛,从显微镜中的简单对比度增强到生命科学中的分子成像。常见的分子成像应用包括

  • 离子浓度测量
  • pH 值测量
  • 通过 FLIM 对内源性荧光团进行无标记成像
  • 观察干细胞的分化
  • 通过 NADH 和 FAD FLIM 进行代谢成像
  • 检测肿瘤
  • 研究癌症起源、癌症发展和癌症进程
  • 监测药物在细胞中的作用
  • FRET 成像
  • 纳米粒子在皮肤中的扩散
  • 给药
  • 个性化化疗
  • NAD(P)H 和 pO2 同步成像
  • 皮肤活体诊断
  • 眼科成像

请参阅bh TCSPC 手册“生物 FLIM 应用 “一章。在所有这些应用中,高灵敏度、高光子效率、高时间分辨率以及解析复杂荧光衰减函数的能力都是关键所在。这些都是选择 Becker & Hickl FLIM 系统的充分理由。

    FLIM 数据分析:适合分子成像

    数据分析由 bh 的传奇软件 SPCImage NG 执行。SPCImage NG 可从单个像素、像素组和 ROI 中的数据推导出多指数衰变参数。其信噪比接近理想水平,衰变成分之间的串扰最小,衰变参数与光子数之间的串扰最小,处理时间不超过几秒钟。它能将这些参数转换成与生物相关的量,如 FRET 距离或代谢比率,并将结果显示为有意义的、漂亮的彩色编码图像。SPCImage NG 功能包括

    • 单、双、三指数衰变模型
    • 用于分析慢衰变的不完全衰变选项
    • 用于眼科 FLIM 的偏移分量选项
    • MLE 程序可精确拟合低光子数
    • GPU 处理,可在数秒内获得结果
    • 与相位图相结合
    • 通过相位图进行图像分割
    • 移动物体的 FLIM 分析
    • 自动生成 IRF – 无需测量 IRF
    • 细胞和组织代谢参数图像
    • FRET 强度和 FRET 距离图像
    • 无需参考寿命的 FRET 分析
    • 衰变成分的振幅和寿命图像
    • 振幅或寿命的比率图像
    • 根据两个光谱通道的图像计算出的比率图像
    • 时间序列或 Z 叠加数据的批量处理

    详情请参阅

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