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Principles
NAD(P)H 和 pO2 同步成像
NAD(P)H 的荧光衰减函数是细胞正在进行氧化（氧化磷酸化）还是还原代谢（糖酵解）的指标。变化的根源在于结合和非结合 NAD(P)H 比例的变化。结合和未结合的部分具有不同的荧光寿命，这反过来又导致衰变曲线的变化，见下图。
在健康细胞中，新陈代谢主要是氧化性的，而在癌细胞中则是还原性的。因此，衰减曲线的形状，特别是 a1/a2 比率，是区分正常细胞和癌细胞的一个参数。新陈代谢成像》一书中阐述了衰变曲线的变化。不幸的是，新陈代谢状态也会随着供氧量的变化而变化。在缺氧条件下，正常细胞的新陈代谢可能会转向糖酵解，表现与癌细胞相似。因此，最好有一种技术能在 NAD(P)H FLIM 过程中跟踪氧浓度（或氧分压，pO2）。
bh 的同步 FLIM / PLIM 技术可同时记录 NAD(P)H 荧光和氧传感器的磷光。该技术基于对激发脉冲序列的额外调制，并建立两个光子分布。FLIM 分布来自激发脉冲周期内的光子时间，PLIM 分布来自调制周期内的光子时间。原理如下图所示。
下图是一个典型的结果。酵母细胞用钌基磷光染料染色。然后通过上述 FLIM/PLIM 过程对细胞进行成像。
详情请参见bh TCSPC 手册“磷光寿命测量的氧传感 “一章。
References
与同步 FLIM/PLIM 相关的出版物
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