同步 FLIM / PLIM

Principles

同步 FLIM / PLIM

有许多辐射弛豫机制发生的时间尺度比荧光要长得多。众所周知的是磷光，即有机染料三重态的发射。室温下的磷光通常很弱。不过，钌、铂、铽和钯的有机络合物会发出强磷光。对于活细胞成像特别重要的是，磷光会被氧气强烈淬灭。因此， 磷光寿命可用作当地氧浓度或氧分压 pO2 的感应函数。
氧气测量对于代谢成像尤为重要。癌细胞和正常细胞的新陈代谢状态不同，但也取决于氧气的可用性。因此，pO2 测量必须与 NAD(P)H FLIM 同时进行。
这项任务可以通过调制 FLIM 系统的激发激光，使其周期在微秒或毫秒范围内来完成。通过激光脉冲周期内的光子时间获得 FLIM 图像，通过调制周期内的时间获得 FLIM 图像。原理如下图所示。

实施

FLIM / PLIM 在 bh DCS-120 共焦和多光子 FLIM 系统中完全实现。它也可应用于其他激光扫描显微镜，只要有调制激发激光的方法。FLIM/PLIM 结果示例如下图所示。

详情和更多参考资料请参阅

bh TCSPC 手册，时间分辨激光扫描显微镜一章，PLIM/FLIM：同步磷光和荧光寿命成像一节。

多维 TCSPC 和多脉冲激发的同步磷光和荧光寿命成像“应用说明

References

同步 FLIM / PLIM 参考文献

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